5月9-13日，由中国畜牧兽医学会主办的第四届中国猪业科技大会（线上会议）的疫病与防治分论坛上，肖少波、王琴、周磊、田克恭等行业权威专家围绕当前疫病流行动态、诊断与检测、免疫与防控以及疫病净化等热点问题给予全面解析，吸引了4.8w人次在线观看。本次论坛内容涉及猪病防治的诸多方面，干活满满。为便于大家了解，波米畜牧对报告部分精彩内容进行整理，供同行参考。
《猪肠道冠状病毒研究进展》
肖少波 华中农业大学教授
猪肠道冠状病毒引起的仔猪腹泻是近10年困扰我国乃至全球养猪业的突出问题。近年来新发的冠状病毒的组织、细胞、宿主感染普有逐渐扩大的趋势，需要我们的高度关注。
1）2010年底出现的PEDV变异株呈现高发病率、高死亡率，且毒株仍在持续变异，优势毒株发生变化。轮状病毒、蓝耳病毒感染可加剧PEDV的流行。
2）我国大部分地区均有PDCoV感染，抗原阳性率为10%~33%。该病毒主要引起腹泻，但组织嗜性广泛，且可以感染多种动物。全球PDCoV全基因组进化分析表明，中国、美国、韩国毒株亲缘关系较近，而具有更强致病性的东南亚毒株可能已经传入我国。
3）2016年发现的HKU2-like猪冠状病毒可引起90%的仔猪死亡率，其致病性仍存在争议。目前该病毒仅存在于广东和福建。
APN是TEGV和PRCV的关键受体，还可能与PDCoV的组织嗜性相关；唾液酸是猪肠道冠状病毒的共受体。
猪肠道冠状病毒的防控
1）高度重视、加强生物安全与监测，加强生物传播和阻断传播途径要内外兼顾。
2）选择同源性更高、针对性强、免疫原性好的疫苗，目前全球存在3类主要PEDV，我国主要为变异毒株G2群。
3）针对性地制定科学、合理的免疫程序；采用不同类型疫苗联合免疫，针对不同健康状态猪群采取不同的免疫策略；针对不同养殖模式采取不同的免疫策略。活疫苗与灭活疫苗联合使用能够使免疫程序更简单，免疫效果更好。
4）应科学返饲，做好生物安全。对于非常严重、反复腹泻、疫苗控制效果不理想的猪场，可考虑采用返饲。对于有轮状病毒、蓝耳病毒或者伪狂犬病毒的猪场可以采用返饲，返饲后免疫灭活疫苗，能够快速诱导高水平的中和抗体。
5）抗猪肠道冠状病毒的药物是研发的方向之一。
6）同时敲除CD163和APN基因的猪对PRRSV和TEGV具有抗性，抗TGEV的精准编辑猪有望推向市场。
《我国猪瘟净化与根除策略》
王琴 中国兽医药品监察所研究员
1970-2020年，中国猪瘟病毒流行株基因组稳定，主要流行基因2.1亚型和少量的基因1.1亚型。现用猪瘟疫苗对我国流行毒株能有效保护，否定了多年认为“由野毒株变异引起免疫失败”的学术争端，一旦监测到野毒株低于81.6%，应立即进行动物实验验证。
C株能抵抗全世界流行的三个基因型野毒的攻击，不仅为世界上一些国家消灭猪瘟做出了贡献，至今对我国猪瘟控制的基本策略有效。但随着猪瘟净化进程的加快，应尽快加强新型DIVA投苗的研发进程，赋予C株新的涵义。
猪瘟无疫国家和地区的预防与控制是通过严密的日常监测与检疫制度，突发疫情时的应急扑灭措施来保持无疫状态。该方法虽然快速有效，但是由于成本过于昂贵和造成环境污染而招致越来越大的争议。
猪瘟染疫国家和地区遏制流行态势的主要手段是疫苗免疫，多数流行国家均实施强制免疫策略。在出现疫情时应立即采取隔离封锁措施，扑杀发病和感染动物，对疫点进行消毒和限制动物流动，对暴露动物和受威胁动物实施紧急免疫以防疫情扩大。非典型猪瘟或持续性感染猪瘟的出现，使猪瘟难以根除。
疫苗在疫病(猪瘟)消灭过程中只是阶段性使用，仅靠疫苗免疫无法彻底控制和根除猪瘟。疫苗免疫在非感染时只能降低猪群的易感性，感染时则可降低发病严重程度，但并不能完全阻断病毒的感染与排毒，更不能消灭猪瘟；如果没有一个好的免疫策略，疫苗免疫也只能是减少一些损失。
新型诊断技术结合信息技术在疫情诊断、分析、监测和生物信息学等防控措施中发挥重要作用，准确快速的诊断技术可以提升传染病的监控能力，及时采取措施控制传染病向更大范围的流行。
我国猪瘟防治还应以预防为主，种群净化以源头控制、分类指导、梯度推进为原则。同时建立以养殖场为防治主体，以疫病净化为防治重点，不断完善的生物安全体系。
《猪繁殖与呼吸综合征流行动态与防控策略》
周磊 中国农业大学副教授
PRRSV根据ORF5可以划分为8个谱系，我国于20世纪90年代中期发生和流行该病，2006年爆发HP-PRRS，2014发现类NADC30毒株，2017以后，出现类NADC30重组毒、HP-PRRSV MLV返强毒等。目前我国主要有lineage1（NADC-30/NADC-34）、lineage3（QYYZ）、lineage 5（VR-2332）、lineage 8（HP-PRRSV/CH-1R/CH-1a)，其中lineage1为目前主要流行毒株。
PRRSV疫苗毒的演化与野毒株的重组是驱动毒株多样性和新毒株产生的重要机制，类 NADC30与疫苗病毒重组频繁。2014年从美国传入的类NADC30和重组毒株比例在增加，且可在猪场长时间持续存在，增加细菌性继发感染和死淘率，造成种猪群和生长猪群生产成绩不稳定。
NADC34毒株和NADC30同样属于Lineage1，其对仔猪的致病性相对HP-PRRSV不明显，但重组后的类NADC-34对猪场造成的危害很大，并且与HP-PRRSV /类NADC30抗血清之间无交叉中和作用。
2020年在美国大量爆发的lineage1c 1-4-4变异株在美国已成为主流毒株，因PRRSV不是猪肉进口检测项目，且美国PRRSV阳性猪允许进入屠宰场，因此其通过猪肉进口传入中国的风险很大，需予以关注。
PRRSV的综合防控主要包括生物安全、科学免疫和控制继发感染三方面。
1）在引种时对后备猪的入群前管理非常重要。
2）PRRS不同类型猪场的疫苗使用原则：一个猪场仅使用一种活疫苗。PRRS阴性猪场（种猪）不用活疫苗；阳性/稳定猪场不广泛使用活疫苗，进行后备猪驯化；阳性/不稳定、疫情发生猪场使用活疫苗并制定合理的免疫程序。
3）做好猪场内部生物安全措施，加强对猪群继发感染的控制。
《新型猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗组合免疫方案》
宋庆庆 金宇生物技术股份有限公司研发总监
常规疫苗没有非常理想的安全及效力的均衡性，灭活苗对异源毒株的交叉保护性差，活疫苗存在重组和毒力返强的风险。
研发团队攻克了病毒嵌合技术、体外重组技术和转基因安全评估技术难关，通过反向遗传操作技术研发基因工程疫苗，该疫苗在经典株的骨架上插入HP-PRRSV的结构蛋白，在提供高HP-PRRSV保护的同时，兼具经典蓝耳疫苗的安全性。
灭活疫苗的保护效果有限，中和抗体的水平比较低，可能出现ADE现象导致发病更严重。
母猪：对于高流行率的阳性不稳定场，猪群严重排毒，可使用活疫苗2次普免，间隔4周。以后每13周进行一次普免；对于低流行率的阳性不稳定场，猪群存在一定的垂直传播，可使用活苗+灭活苗；对于阳性稳定场，可使用活苗或者灭活苗普免。
仔猪：根据监测结果选择不同的免疫方案，主要有活苗免疫、活+死苗免疫。
经典株与流行株重组疫苗是防控蓝耳病趋势，亚单位疫苗对高致病蓝耳具有一定的保护力。
《标准物质在猪病诊断检测中的应用》
田克恭 普莱柯、河南农业大学教授
标准物质是指具有一个或多个足够均匀的特性值的物质或材料，其具有准确性、均匀性、稳定性的特点。目前体外诊断的标准物质有：核酸标准物质（病原微生物、质粒、DNA/RNA、假病毒）、蛋白标准物质、血清、多糖、激素、免疫因子、小分子化合物等。
标准物质在兽医领域的使用现状：2018年中国动物疫病防控中心研制的猪繁殖与呼吸综合征病毒系列标准品成为我国首个兽医领域核酸定量标准物质。目前，兽医领域标准物质仅有21类核酸标准物质，暂无蛋白类、血清类标准物，这对于几百种动物疫病来说是杯水车薪。
标准物质主要用于设备和测量程序的校准、建立溯源性、方法确认、给其他材料赋值和质量控制。在兽医领域，标准物质的应用如下：
1)诊断试剂生产的质量控制：生产全过程的质量控制都依赖于标准物质。
2)诊断试剂的性能验证：要用标准物质对性能（重复性、分析敏感性、特异性）进行验证后，再用临床样品进行验证。例如对ASFV qPCR试剂盒进行性能验证时：使用定量的假病毒标准物质评估分析敏感性、重复性、特异性。
3)检测仪器性能验证：仪器生化性能验证需要使用标准物品。
4)检测人员操作评价：利用标准物质评价人员倍比稀释操作是否规范性、重复性是否良好。
5)检测实验室能力验证：给予标准物质，通过实验室间比对进行能力验证。评价的指标有：平均值、标准偏差、变异系数、最大值、最小值等。针对实验室的检测结果，可以给出相应建议，从而提高实验室的检测能力。
《E2基因工程亚单位疫苗对猪瘟的深度防控与净化》
王杨 天康生物制药有限公司技术服务部主任
我国主要流行的是非典型猪瘟，其流行范围广、无季节性，发病常见于断奶前后和出生10日龄以内的仔猪。与经典猪瘟的临床症状不同，非典型猪瘟以顽固性腹泻、繁殖障碍（母猪流产，仔猪死胎、木乃伊胎等）、呼吸道症状、神经症状为主。
猪瘟病毒感染会引起严重的白细胞减少，造成免疫抑制，常与猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒混合感染。
在我国猪瘟疫苗为1.1亚型，而流行的猪瘟野毒为2.1亚型，那么该疫苗的保护效果就有待评估。有研究指出，虽然我国的猪瘟疫苗免疫覆盖率高，但实际阳性保护率却较低。因此，我们要给予猪瘟更多的关注，要多监测猪场的猪瘟抗体、抗原水平。
目前猪瘟疫苗可以分为活疫苗、灭活苗两大类。活疫苗包括了乳兔源、脾淋源、牛睾丸原代细胞源、ST传代细胞源、PK细胞源的疫苗。灭活苗包括了猪瘟结晶紫疫苗、猪瘟E2亚单位疫苗。1.1亚型的猪瘟乳兔源疫苗是传统的猪瘟保护疫苗，而现在猪瘟E2亚单位疫苗对猪瘟E2基因进行了修饰，涵盖了1.1、2.1、2.2、2.3亚型的有效抗原表位，无论在深度防控还是在紧急免疫中表现都更好，是未来猪瘟疫苗的流行趋势。相对于之前的猪瘟E2疫苗，目前的E2疫苗无论在抗原表位修饰、抗原缓释、抗原含量等方面都有了更好的提升。
《猪支原体肺炎肺部评分的至简方案》
申世川 法国诗华兽医服务部经理
猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的慢性接触性呼吸道疾病，又称地方流行肺炎或猪气喘病，在全球养猪业流行。猪支原体肺炎主要引起保育猪、种猪、育肥猪干咳，导致日增重和饲料转化率降低，影响养猪效益，也可能为亚临床感染，不表现临床症状。猪肺炎支原体若与其他条件致病菌或呼吸道病毒混合感染，可能导致死亡率增加。
猪肺炎支原体无细胞壁、生长速度缓慢、培养困难，不同肺炎支原体菌株毒力不同。其感染的特点为：纤毛破坏、细胞因子浸润导致肺炎，抗原逃逸导致持续性感染，免疫力下降。剖检病变主要为：肺尖叶、心叶、中间叶等对称样肉变，严重时可见于膈叶前部。在慢性感染后，肺部剖检常呈深红色肉变，切面潮湿，有少量泡沫的状态。病理组织变化为上皮细胞增生、单核细胞浸润、肺泡性气肿、肺细胞过度增大等。
常用的诊断方法如听咳嗽声音、血清学抗体检测、肺炎支原体PCR检测、病原分离等不太适用于该病的临床诊断。对于猪支原体肺炎的诊断主要依靠猪支原体肺炎屠宰检查、肺部评分。
屠宰检查不违背生物安全原则，可以发现一些亚临床疾病，且样品数量大，对养猪有一定的指导作用。屠宰检查、肺部评分对于猪场是非常必要的，因为猪的呼吸道疾病主要发生在育肥期，通过屠宰检查可以了解呼吸道疾病的流行状况。另一方面，肺部评分是一种对群体动物健康状态的评估，并非仅针对患病或死亡动物。该方法重复性好，可与其他猪场的情况进行比较，还可以用于评估免疫效果。
《猪圆环高效防控方案-好抽、易打、防僵猪》
曾亮明 兆丰华集团猪疫苗产品中心总监
猪圆环病毒（PCV）是迄今发现的最小的动物病毒之一。PCV1无致病性；PCV2广泛存在，是引起猪圆环病毒相关疾病最主要的致病因素；PCV3主要流行于我国华中、华南地区；PCV4是近几年刚发现的，有待进一步研究。圆环病毒虽然病毒粒子小，但其不同亚型表面蛋白具有差异，这提示我们要选择交叉保护效果好的疫苗进行免疫。
PCV可以引起多种临床症状：1）断奶仔猪多系统消耗综合征（PMWS），其主要表现为仔猪消瘦、呼吸困难、皮肤苍白、体表淋巴结肿大、黄疸和腹泻。2）猪皮炎肾病综合征（PDNS），主要表现为皮肤出现不规则疹块、跛行、发热，病理剖检可见肾脏肿大、苍白、有出血点。3）猪呼吸道并综合征（PRDC），主要表现为生长缓慢、咳嗽、呼吸困难等。4）繁殖障碍，造成流产、死胎、木乃伊胎。
目前中国有55个厂家生产了16种PCV疫苗，包括了全病毒灭活疫苗、联苗、基因工程疫苗、进口疫苗，保护效果最全面的是全病毒疫苗。
PCV疫苗仍存在一些缺陷：1）PCV组织噬性广，抗原表位多样，免疫原性差，使得简单制备的疫苗不能起到理想的效果。2）疫苗解除免疫抑制的效果差。3）双向佐剂和油苗的使用体验差，抽取和注射困难，注射后有漏液、猪脖子鼓包等现象。因此，PCV疫苗的研发需要朝着这三个方向进一步努力。
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